各位战友，请教一下问题，就是大家在构建带有报告基因的启动子区表达载体时，是如何选定启动子区的长度呢？
　　　此外，假如在构建时启动子长度延至其基因的ATG之后，启动子是否会影响gus基因的表达呢？

请指教 ，多谢

---

顶一下

---

看你的描述，应该是做植物启动子活性或者是启动子功能分析的？

在没有实验验证所克隆的5‘侧翼片段具有启动子活性前，应该还不能称它是某某基因的启动子吧~

1。假如要验验证所克隆的5‘侧翼片段就是目的基因的启动子，则连入载体的5‘侧翼片段长度越长越好。因为你永远无法知道启动子的范围有多大，广义的启动子更包括了远侧的增强子和近侧的基础启动子区。而狭义的启动子特指基础启动子区，可以使用数据库猜测大约范围。所以要根据你的需要选择下一步的实验方案。

2。假如在构建时启动子长度延至其基因的ATG之后，启动子是否会影响gus基因的表达呢。
GUS基因可以融合表达。只要你构建完成后，保证翻译过程中GUS基因不移码就可以。我们实验室有人也采取这样的操作策略，结果没问题，GUS都能染色成功。查阅国外的文献，很多老外也是这样做的，不要当心。最要害的是融合后的GUS千万不能移码。

---

多谢 我还想请问一下 用那个数据库可以猜测其范围啊
我现在得到了该基因的5‘侧翼序列约1.6kb 正常情况下来讲 是不是应该能够包括近侧的启动子区域了？

---

一般认为是包括了近侧的启动子区域.

做植物的最常用的有两个
PLACE（http://www.dna.affrc.go.jp/PLACE/）
PLANCARE（http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/）

---

非常感谢